Table | Card | RUSMARC | |
Allowed Actions: Read Download (1.7 Mb) Group: Anonymous Network: Internet |
Annotation
Профилактика тяжёлых кишечных инфекций, в том числе, холеры, не теряет своей актуальности в связи с эпизодическими вспышками. Создание нового варианта противохолерной вакцины на основе генетически модифицированного нетоксигенного штамма V. cholerae, дополненного рекомбинантной субъединицей β холерного токсина (CtxB) является перспективным подходом. Субъединица β вызывает иммунный ответ, но не оказывает токсического действия без субъединицы ɑ. Изучен мировой опыт 302 получения рекомбинантного CtxВ с использованием бактериальных культур, выбраны подходы для наработки и очистки CtxB в лабораторных условиях. Также проанализирована литература, посвящённая особенностям взаимодействия CtxВ с клетками кишечного эпителия [1]. С использованием стандартных молекулярно-биологических методов получена линейка плазмид, позволяющих произвольно запускать экспрессию ctxB в клетках E. coli. Сконструированные векторы различаются по кодируемой ими сигнальной последовательности, слитой с геном целевого белка. При активации экспрессии синтезируется химерная полипептидная молекула, содержащая CtxB и фрагмент белка OmpA E. coli либо белка PelB Erwinia carotovora [2]. Эти последовательности обеспечивают выход нарабатываемого токсина в среду культивирования и позволяют упростить процесс его очистки. Цель работы: Создать генетические конструкции для наработки β- субъединицы холерного токсина, определить оптимальные условия индукции целевого белка (температура, продолжительность индукции, состав среды), место его накопления (цитоплазма, периплазма, среда культивирования) и предпочтительный способ его выделения.
Usage statistics
|
Access count: 71
Last 30 days: 19 Detailed usage statistics |