| Table | Card | RUSMARC | |
|
|
Allowed Actions: –
Action 'Read' will be available if you login or access site from another network
Group: Anonymous Network: Internet |
Document access rights
| Network | User group | Action | ||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| RSAU-MTAA CSL Local Network | All |
|
||||
| Internet | Readers |
|
||||
|
Internet | Anonymous |
Table of Contents
- В наше время фармацевтическая промышленность остро нуждается в бесперебойных поставках больших количеств качественного растительного сырья для получения вторичных метаболитов. Также необходимо изучение лекарственных свойств уже использующихся в медици...
- Trigonella foenum-graecum L. (пажитник сенной) является объектом множества исследований. Его повсеместное использование в пищевой и фармакологической промышленности обусловлено высокой питательной ценностью и наличием в семенах ценных продуктов метабо...
- В данной работе представлена общая характеристика вида Trigonella foenum-graecum L., включающая в себя ботаническое описание культуры, географическое распространение, биохимический состав растений. Рассматривается значение и применение вторичных метаб...
- В ходе исследования растения вида Trigonella foenum-graecum L. были успешно введены в культуру in vitro. Получена хорошо растущая каллусная ткань. Также был проведен анализ содержания и накопления вторичных метаболитов (фенольных соединений, в частнос...
- С древних времен люди используют растения для лечения различных заболеваний. До появления ятрохимии в XVI веке растения были главным источником лекарственных средств. Тем не менее, снижение эффективности синтетических препаратов и увеличение противопо...
- Человечество активно использует более 20 тыс. различных химических соединений, синтезируемых растениями, и их число постоянно растет (Morton, 1990). Широкий спектр биологической активности и «мягкость» действия являются основным преимуществом фармакол...
- Пажитник сенной (T. foenum-graecum) включает в свой состав комплекс ценных биологически активных соединений: фенолы, флавоноиды, стероидные сапонины, жирные масла, каротиноиды, алкалоиды и полисахариды. Эта культура активно применяется в фармацевтичес...
- Известно, что биологически активные вещества (БАВ) растительного происхождения играют очень важную роль в современной медицине. Однако их использование часто ограничено доступностью растительных ресурсов и может поставить под угрозу исчезновения редки...
- В связи с этим целью работы являлось изучение морфофизиологических особенностей асептических растений T. foenum-graecum.
- Для достижения поставленной цели было необходимо выполнить следующие задачи:
- 1. Получить асептические растения T. foenum-graecum;
- 2. Изучить влияние различных факторов на рост и эффективность клонального микроразмножения асептических растений T. foenum-graecum;
- 3. Изучить морфофизиологический потенциал каллусной культуры T. foenum-graecum;
- 4. Определить эффективность накопления вторичных метаболитов (фенольные соединения, флавоноиды) в асептических растениях T. foenum-graecum;
- 5. Получить суспензионную культуру T. foenum-graecum.
- 1.1 Ботаническая характеристика T. foenum-graecum
- Пажитник сенной (Trigonella foenum-graecum L.) – однолетнее травянистое растение, произрастающее в Восточной Европе и Средней Азии, в основном культивируется в Индии, Египте и Марокко (Snehlata, Payal, 2012).
- Таксономическое положение пажитника сенного:
- Царство Plantae
- Отдел Magnoliophyta
- Класс Magnoliopsida
- Порядок Fabales
- Семейство Fabaceae
- Род Trigonella
- Вид Trigonella foenum-graecum L. (Flammang et al., 2004).
- В данный момент обсуждается точное количество видов пажитника. Систематики, такие как Линней, предполагали, что может существовать до 260 видов пажитника. В настоящее время известно в общей сложности 95 видов рода Trigonella. Большинство видов, включа...
- С морфологической точки зрения, пажитник – растение с опушенным прямостоячим стеблем, однолетник семейства бобовые, достигающий в высоту 30...60 см. На длинных тонких стеблях расположены тройчатые, зубчатые, серо-зеленые, обратнояйцевидные листья длин...
- Семена пажитника мелкие (4...5 мм в длину, 2 мм в ширину), твердые, коричневато-желтые, с мелкозернистой поверхностью, цвет может варьироваться. Они сплющены и имеют очень характерный ромбовидный контур. Почти в центре одной из длинных узких сторон на...
- Растение источает пряный запах, который сохраняется на руках после прикосновения. Существуют дикие и культивируемые разновидности. Для пажитника наиболее подходящим является мягкий средиземноморский климат. Растения созревают примерно через четыре мес...
- Семена и надземные части пажитника веками использовались в качестве ценного источника белка в питании человека и животных, а также в традиционной медицине. В древней индийской традиционной системе медицины, Аюрведе, пажитник применялся в качестве важн...
- 1.2 Фитохимия T. foenum-graecum
- Общее содержание белка и аминокислотный состав семян пажитника, люпина белого, твердой пшеницы (Leela, Shafeekh, 2008)
- Было обнаружено большое количество БАВ в семенах и листьях пажитника. Некоторые из них представлены в табл. 1.5.
- Пажитник греческий содержит ряд сапонинов и стероидных сапогенинов. Диосгенин был обнаружен в эмбрионе. Сообщалось о наличии двух фуростаноловых гликозидов, предшественниках диосгенина с F-кольцом, а также гликозидов гедерагенина. В стебле присутствую...
- 1.3 Использование T. foenum-graecum в медицине
- Хорошо известно, что специи стимулируют работу желудка. Считается, что они усиливают выделение слюны и секрецию желудочного сока, следовательно, способствуют пищеварению. Выделение слюны и желудочного сока усиливается, когда нервные центры обоняния ст...
- В нескольких исследованиях на животных, проведенных в последние годы, изучалось влияние диетических семян пажитника на желудочно-кишечные параметры. Диетический пажитник (2 г в течение 6...8 недель) оказывал наибольшее стимулирующее влияние на секреци...
- 1.4 Культивирование T. foenum-graecum in vitro
- Биотехнология играет жизненно важную альтернативную роль в производстве вторичных метаболитов фармацевтических растений для поддержки промышленного производства и смягчения последствий чрезмерной эксплуатации природных источников. Ценные фармацевтичес...
- В настоящее время множество видов семейства Бобовые уже введены в культуру in vitro. Хорошо изученными представителями этого семейства являются растения рода Trigonella L., для которых проведен ряд исследований, ориентированных на улучшение технологий...
- На данный момент самой распространенной питательной средой для культивирования растений in vitro является среда Мурасиге и Скуга (МС). Она эффективно поддерживает рост клеточных культур большинства растений. Различные вариации состава питательных вещ...
- Для клонального микроразмножения в исследованиях чаще всего используют части листьев и стебли растения. Например, в исследованиях Lohvina & Yurin (2014) для оценки биосинтетического и антиоксидантного потенциала культуры клеток и тканей были использов...
- Для индукции каллусообразования также чаще всего используют питательную среду МС с добавлением фитогормонов. В исследованиях Глушаковой с соавт. (2013) были использованы 2,4-дихлорфеноксиуксусная кислота (2,4-Д), кинетин, индолил-3-уксусная кислота (И...
- Похожие исследования проводились членами той же группы ученых Логвиной и Юриным, когда для индукции каллусогенеза использовали питательную среду МС с добавлением определенных видов фитогормонов в разных концентрациях в зависимости от того, яровой это ...
- 2.1 Растительный материал
- 2.2 Получение асептических растений T. foenum-graecum
- 2.3 Клональное микроразмножение T. foenum-graecum
- 2.4 Индукция каллусогенеза T. foenum-graecum
- В качестве доноров эксплантов использовали растения, выращенные в асептических условиях на безгормональной среде МС.
- Для индукции каллусогенеза листовые (5×5 мм) и стеблевые (длиной 5...7 мм) экспланты помещали на питательную среду МС (3 % сахарозы) с добавлением различных комбинаций ауксинов и цитокининов:
- 1. 2 мг/л 2,4-Д + 2 мг/л кинетина
- 2. 2 мг/л 2,4-Д
- 3. 2 мг/л кинетина
- 4. 3 мг/л БАП
- Культивирование проводили в условиях световой комнаты при температуре 21 С и 16-часовом световом дне. Пассаж осуществляли в течение 30 дней. Каллус пересаживали на свежую питательную среду 4 раза за 120 дней. Повторность опыта 5-кратная, по 8 экспла...
- 2.5 Получение суспензионной клеточной культуры T. foenum-graecum
- Для получения суспензионной клеточной культуры светлые участки каллусной ткани (массой 0,6...0,8 г), помещали в плоскодонные колбы объемом 100 мл, содержавшие 15 мл жидкой (без агара) питательной среды МС. Были использованы 3 варианта питательной сред...
- 2.6 Определение жизнеспособности культивируемых единиц в суспензионной культуре T. foenum-graecum
- Так как исследуемые суспензии являлись крупноагрегированными, был выбран способ определения жизнеспособности культур по подсчету культивируемых единиц. Подсчет отдельных клеток не представлялся возможным.
- Пробу объемом 1 мл отбирали пипеткой с обрезанным носиком. После смешивания с витальным красителем (0,025 % раствор синьки Эванса) ожидали 1 минуту. Каплю окрашенной суспензии помещали на предметное стекло, накрывали покровным стеклом. Подсчет окрашен...
- 2.7 Приготовление спиртового экстракта из растений и каллуса T. foenum-graecum
- К каллусу или зеленым частям растения добавляли 5 мл 70 %-ного этилового спирта, после чего подвергали измельчению в фарфоровой ступке. Полученную взвесь переливали в стеклянные пробирки и ставили на ротационный шейкер на 1 час. По истечению часа экст...
- 2.8 Определение суммарного содержания фенольных соединений в растениях и каллусе T. foenum-graecum
- К 0,25 мл спиртового экстракта добавляли 3 мл дистиллированной воды и 0,25 мл реактива Фолина-Дениса. Через 3 минуты доливали 0,5 мл насыщенного раствора соды и доводили суммарный объем до 5 мл дистиллированной водой. Спустя 1 час измеряли оптическую ...
- 2.9 Определение суммарного содержания флавоноидов в растениях и каллусе T. foenum-graecum
- К 1,5 мл спиртового экстракта добавляли 75 мкл 10 %-ного спиртового раствора хлорида алюминия, 75 мкл 1М водного раствора ацетата калия и 2,1 мл дистиллированной воды. Спустя 30 минут измеряли оптическую плотность при длине волны 415 нм. Повторность о...
- 2.10 Статистическая обработка данных
- Статистическую обработку данных проводили по стандартным методикам (Доспехов, 1985) с использованием статистических функций приложения Microsoft Office Excel.
- 3.1 Получение асептических растений T. foenum-graecum
- Семена T. foenum-graecum подвергались стерилизации 5 %-ным водным раствором гипохлорита натрия (NaOCl) в течение 10, 15 и 20 минут, а также 10 %-ным водным раствором пероксида водорода (H2O2) в течение 15 и 20 минут.
- Спустя 4 суток на всех вариантах наблюдалась дружность всходов. Через 7 суток после начала культивирования оценивали эффективность прорастания семян в зависимости от режима стерилизации (табл. 3.1, рис. 3.1).
- Таблица 3.1
- Эффективность прорастания семян T. foenum-graecum после стерилизации
- Рис. 3.1. Эффективность прорастания семян T. foenum-graecum после стерилизации
- Исходя из данных статистической обработки в опыте по изучению влияния режима стерилизации (табл 3.1, рис. 3.1) на эффективность прорастания семян T. foenum-graecum опытные варианты достоверно не отличались от контрольного (нестерильного) проращивания....
- 3.2 Клональное микроразмножение T. foenum-graecum
- Рис. 3.4. Морфометрические показатели асептических растений T. foenum-graecum при клональном микроразмножении на различных питательных средах
- На всех питательных средах, кроме QL, у черенков не наблюдали ризогенез. Рост побегов был сильно замедлен или практически отсутствовал, что, скорее всего, обусловлено отсутствием корней. В контрольном варианте (рис. 3.4Г) в связи с отсутствием регулят...
- Частота ризогенеза у черенков, культивируемых на питательной среде QL, составила 21,6 %. Пажитник, выращиваемый на данной среде (рис. 3.4А), отличался наибольшей высотой и активным ростом вегетативной массы вне зависимости от наличия корневой системы.
- При использовании среды B5 уже на 2-й неделе наблюдали значительное пожелтение растений (рис. 3.4Б). Использование среды B5 дало самый низкий результат по количеству листьев из всех опытных вариантов.
- Рис. 3.4. Микрорастения T. foenum-graecum на питательных средах различного состава: А – QL + 1 мг/л ИМК, Б – B5 + 1 мг/л ИМК, В – МС + 1 мг/л ИМК, Г – безгормональная МС (контроль)
- Статистическая обработка данных, полученных при изучении влияния минерального состава питательной среды на рост T. foenum-graecum in vitro показывает, что эффективнее всего для клонального микроразмножения пажитника сенного использовать среду QL + 1 м...
- 3.3 Индукция каллусогенеза T. foenum-graecum
- Каллус – скопление дедифференцированных, тотипотентных клеток растения. Культуры каллусных клеток активно изучаются и используются для получения вторичных метаболитов растений.
- Для индукции каллусообразования на листовых и стеблевых эксплантах пажитника сенного использовали питательную среду МС с добавлением ауксинов и цитокининов в различных концентрациях. Для контроля применяли среду МС без добавления фитогормонов и регуля...
- 3.3.1 Эффективность каллусогенеза T. foenum-graecum в зависимости от гормонального состава питательной среды и типа экспланта
- Для изучения режимов индукции каллусогенеза использовали листовые и стеблевые экспланты, которые помещали на питательную среду МС с добавлением веществ ауксиновой (2,4-Д) и цитокининовой (БАП, кинетин) природы, отдельно или в сочетании.
- Лучший результат был получен с использованием питательных сред МС + 3 мг/л БАП и МС + 2 мг/л 2,4-Д + 2 мг/л кинетина. Частота каллусогенеза на обоих типах экспланта приближалась к 100 % (табл. 3.3).
- При использовании среды МС + 2 мг/л 2,4-Д эффективность каллусогенеза была заметно ниже, чем у вышеперечисленных вариантов, хоть и превышала 50 %.
- В варианте с добавлением 2 мг/л кинетина каллус практически не образовывался, для листовых эксплантов частота каллусогенеза составила 8,2 % (табл. 3.3). На стеблевых эксплантах наблюдался стеблевой органогенез (рис. 3.5).
- На контрольном варианте каллус практически не образовывался. В зависимости от использования различных эксплантов достоверных различий обнаружено не было. Для дальнейших опытов (по получению суспензионной культуры) использовали каллус, культивируемый н...
- Таблица 3.3
- На 28-е сутки первого пассажа измерили содержание сухого вещества в каллусных тканях, полученных на питательных средах различного гормонального состава. Результаты представлены в табл. 3.4 и рис. 3.6.
- Таблица 3.4
- Из полученных данных можно сделать вывод, что тип экспланта не влияет на массу каллуса и процентное содержание сухого вещества. Гормональный состав питательной среды не оказывает значительного влияния на процент сухого вещества, однако заметно воздейс...
- Рис. 3.7. Каллус T. foenum-graecum на питательных средах различного гормонального состава: А – МС + 3 мг/л БАП, Б – МС + 2 мг/л 2,4-Д, В – МС + 2 мг/л 2,4-Д + 2 мг/л кинетина
- 3.3.2 Определение суммарного содержания фенольных соеденений в каллусе T. foenum-graecum
- Фенольные соединения играют важную роль в метаболизме растений. Они участвуют в процессах фотосинтеза и дыхания. Было изучено влияние гормонального состава питательной среды и продолжительность пассирования каллусной ткани пажитника сенного на суммарн...
- Таблица 3.5
- Суммарное содержание ФС (ССФС) в каллусных тканях T. foenum-graecum, культивируемых на питательной среде MС различного гормонального состава
- 3.3.2 Определение суммарного содержания флавоноидов в каллусе T. foenum-graecum
- Флавоноиды – наиболее многочисленный класс природных ФС, для которых характерно структурное многообразие, высокая и разносторонняя активность и малая токсичность. В медицине и фармацевтике активно применяются различные растения, содержащие флавоноиды....
- В экспериментах было определено влияние гормонального состава питательной среды и продолжительности пассирования каллусной ткани пажитника сенного на суммарное содержание флавоноидов. Результаты измерений представлены в табл. 3.6 и на рис. 3.9.
- Таблица 3.6
- Суммарное содержание флавоноидов (ССФ) в каллусных тканях T. foenum-graecum, культивируемых на питательной среде MС различного гормонального состава
- Рис. 3.9. Суммарное содержание флавоноидов (ССФ) в каллусных тканях T. foenum-graecum, культивируемых на питательной среде MС различного гормонального состава
- Суммарное содержание флавоноидов в исследуемых образцах каллуса значительно ниже, чем в семенах пажитника сенного (7,2 мг/г сырой массы), а также существенно снижается их среднее значение с каждым новым пассажем (рис. 3.9). В варианте с 2 мг/л 2,4-Д п...
- 3.4 Получение суспензионной культуры T. foenum-graecum
- Суспензионные культуры растительных клеток обладают рядом преимуществ, которые делают их пригодными для получения вторичных метаболитов. Их можно выращивать в асептических условиях с использованием классической технологии ферментации, а также легко ма...
- Для получения суспензионной культуры пажитника сенного каллус, культивируемый на средах МС + 3 мг/л БАП, МС + 2 мг/л 2,4-Д + 2 мг/л кинетина и МС + 2 мг/л 2,4-Д переносили на жидкие среды того же состава. Жизнеспособность определяли на 14-е сутки пасс...
- Полученные суспензии характеризовались низкой жизнеспособностью (уже на втором пассаже ниже 50 %; табл. 3.7), из-за чего дальнейшие манипуляции над ними не проводили.
- Таблица 3.7
- Жизнеспособность суспензионных культур T. foenum-graecum, культивируемых на питательной среде MS с различным гормональным составом
- Таким образом, изученные варианты минерального и гормонального состава питательной среды не подходят для устойчивого культивирования суспензионной культуры пажитника сенного. Необходимо продолжать исследования по выявлению оптимальных условий культиви...
- 4.1 Общие требования охраны труда
- 4.1.1. Общая организация работы по охране труда в лаборатории возлагается на руководителя лаборатории. Руководитель лаборатории обязан организовать обучении и проведении инструктажа работников лаборатории по технике безопасности.
- 4.1.2. Заведующий лабораторией не имеет права допускать к работе лиц, не изучивших инструкции по безопасности.
- 4.1.3. Инструктируемый должен тщательно изучить:
- опасные моменты при проведении работ и способы их предупреждения;
- меры первой помощи при отравлениях, ожогах и поражениях током;
- инструкцию по противопожарной безопасности;
- освоить пользование противопожарными средствами.
- 4.1.4. К работе в химической лаборатории допускаются лица не моложе 18 лет, прошедшие медицинскую комиссию, обученные и аттестованные по правилам техники безопасности при работе с агрессивными средами.
- 4.1.5. К самостоятельной работе допускаются лица, прошедшие стажировку на рабочем месте в течение не менее трех «смен», о чем делается соответствующая запись в журнале прохождения инструктажа.
- 4.1.6. К работе с радиоактивными веществами, ядами, газовыми баллонами, аппаратами, сосудами высокого давления допускаются сотрудники лишь после обучения и проверки их знаний комиссией и имеющие соответствующие удостоверения.
- 4.1.7. Ознакомление сотрудников с инструкцией по безопасности и другими действующими инструкциями в лаборатории должно подтверждаться личными подписями инструктируемого в журнале инструктажа по технике безопасности на рабочем месте не реже чем раз в 6...
- 4.1.8. При изменении тематики научно-исследовательских работ заведующий лабораторией обязан разработать требования техники безопасности с учетом специфики работы.
- 4.1.9. Сотрудник, нарушивший правила и инструкцию по технике безопасности, независимо от принятых мер, подвергается внеочередному инструктажу и проверке знаний по технике безопасности.
- 4.1.10. Лаборанты допускаются до работы лаборатории при наличии у них следующих средств индивидуальной защиты: халат хлопчатобумажный; перчатки; очки защитные.
- 4.1.11. Помещение лаборатории должно быть оборудовано противопожарным инвентарем (огнетушителем и другими средствами).
- 4.1.12. В помещении лаборатории должна быть разработана и утверждена схема эвакуации персонала на случай пожара или других чрезвычайных ситуаций. Двери эвакуационных выходов должны открываться наружу.
- 4.1.13. Лаборатория должна быть оборудована приточно-вытяжной вентиляцией, иметь водопровод, канализацию, подводку газа и электроэнергии, центральное отопление и горячее водоснабжение.
- 4.1.14. В каждой лаборатории должна быть аптечка для оказания первой помощи.
- 4.1.15. В помещениях лаборатории запрещается:
- загромождать и захламлять помещения, коридоры, проходы и подходы к средствам пожаротушения;
- убирать пролитую огнеопасную жидкость при зажженных горелках и нагревательных приборах;
- хранить продукты или принимать пищу, а также курить;
- оставлять рабочее место неубранным;
- оставлять без присмотра зажженные горелки и нагревательные приборы, работать на горелках с неисправными кранами, держать вблизи горящих горелок вату, марлю, спирт и другие воспламеняющиеся вещества;
- зажигать огонь и включать ток, если в лаборатории пахнет газом;
- при работе в вытяжном шкафу держать голову под вытяжным отверстием;
- пробовать на вкус и вдыхать неизвестные вещества;
- наклонять голову над сосудом, в котором кипит или в который налита легковоспламеняющаяся жидкость;
- хранить запасы ядовитых, сильнодействующих, взрывоопасных веществ и растворов на рабочих столах и стеллажах;
- хранить и применять реактивы без этикеток;
- хранить в рабочих помещениях какие-либо вещества неизвестного происхождения.
- 4.1.16. В целях исключения поражений электрическим током запрещается пользоваться неисправным электрооборудованием и неисправной электропроводкой, и самостоятельно ремонтировать электропроводку и электрооборудование.
- 4.2 Требования охраны труда перед началом работы
- 4.2.1. До начала работы проверить состояние рабочего места, инвентаря, а также чистоту рабочего места.
- 4.2.2. За 30 минут до начала работы включить в лаборатории приточно-вытяжную вентиляцию.
- 4.2.3. Надеть положенную спецодежду, застегнув её на все пуговицы (завязки), не допуская свисающих концов, убрать волосы под головной убор. Подготовить для работы другие средства индивидуальной защиты (СИЗ).
- 4.2.4. Обо всех обнаруженных недостатках доложить руководителю лаборатории и действовать по его указанию.
- 4.3 Требования охраны труда во время работы
- 4.3.1. Выполнять только ту работу, которую поручил руководитель лаборатории.
- 3.2. При выполнении работ с повышенной опасностью, при работе в ночное и вечернее время, в праздничные и в выходные дни в лаборатории должно находится не менее 2 человек, при этом один назначается старшим.
- 4.3.3. Работать с концентрированными кислотами и щелочами без защитных приспособлений (очки, перчатки) запрещается.
- 4.3.4. Использовать лабораторное оборудование только по прямому назначению.
- 4.3.5. В течение всего рабочего дня содержать в порядке и чистоте рабочее место, не допускать загромождения подходов к рабочему месту, пользоваться только установленными проходами.
- 4.3.6. Посуду после работы с кислотами, щелочами и ядовитыми веществами необходимо сразу же тщательно мыть.
- 4.3.7. При обращении со стеклянной химической посудой и приборами необходимо соблюдать меры предосторожности. При мойке посуды ершиком или стеклянной палочкой следует быть особенно осторожным, так как ими легко пробить дно или стенки стеклянной посуды.
- 4.3.8. Газовую горелку следует содержать в чистоте, заправлять вдали от открытых источников огня, не допускать сильного нагрева резервуара и не оставлять зажженную горелку без надзора.
- 4.3.9. Работы с использованием вредных химических веществ должны проводиться в вытяжном шкафу.
- 4.3.10. Летучие химические вещества следует хранить вдали от нагревательных приборов и открытого огня. Кислоты и щелочи хранить в стеклянной закрытой посуде отдельно от реактивов и красок. При разбавлении концентрированных кислот во избежание разбрызг...
- 4.3.16 Все жидкие отходы, образующиеся в процессе работы, перед сбросом в канализационную систему подлежат обязательному химическому обеззараживанию.
- 4.3.17 Перед использованием посуда, пипетки, оборудование, шприцы и т.д. должны быть проверены на целостность и исправность.
- 4.3.19 Не использовать для сидения случайные предметы и оборудование.
- 4.3.20 Соблюдать правила поведения на территории предприятия, в производственных, вспомогательных и бытовых помещениях.
- 4.3.22 В случае плохого самочувствия прекратить работу, поставить в известность своего руководителя и обратиться к врачу.
- 4.4 Требования охраны труда в случае чрезвычайных происшествий
- 4.4.1. При возникновении любых неполадок оборудования биотехнологической лаборатории, угрожающих аварией на рабочем месте:
- прекратить его эксплуатацию, а также подачу к нему электроэнергии и т.п.;
- доложить своему руководителю;
- действовать в соответствии с полученными указаниями.
- 4.4.2. При обнаружении на металлических частях оборудования напряжения (ощущение действия электротока) необходимо отключить оборудование от сети и доложить своему руководителю.
- 4.4.3. Если в разлитой жидкости имеются осколки стекла, следует удалить их при помощи плотных листов картона, пластиковых совочков, щипцов и пинцетов, а затем выбросить все в прочные биозащитные контейнеры.
- 4.4.4. При аварии во время работы на центрифуге дезинфекцию производить после отключения ее от электросети и не ранее чем через 40 минут после остановки ротора.
- 4.4.5. При обнаружении дыма и возникновении пожара немедленно объявить пожарную тревогу, принять меры к ликвидации пожара с помощью имеющихся первичных средств пожаротушения, поставить в известность своего руководителя. При необходимости вызвать пожар...
- 4.4.6. Запрещается применять воду и пенные огнетушители для тушения электропроводок и оборудования под напряжением, так как пена является хорошим проводником электрического тока. Для этих целей используются углекислотные и порошковые огнетушители.
- 4.4.7. В условиях задымления и наличия огня в помещении передвигаться вдоль стен, согнувшись или ползком; для облегчения дыхания рот и нос прикрыть платком (тканью), смоченной водой; через пламя передвигаться, накрывшись с головой верхней одеждой или ...
- 4.4.8. При несчастном случае немедленно освободить пострадавшего от действия травмирующего фактора, соблюдая собственную безопасность, оказать пострадавшему первую помощь, при необходимости вызвать бригаду скорой помощи по телефону 103 или 112. По воз...
- 4.4.9. В случае ухудшения самочувствия, появления рези в глазах, резком ухудшении видимости – невозможности сфокусировать взгляд или навести его на резкость, появлении боли в пальцах и кистях рук, усилении сердцебиения немедленно покинуть рабочее мест...
- 4.5. Требования охраны труда по окончании работы
- 4.5.1. По окончании рабочего дня каждый работник лаборатории обязан проверить и привести в порядок свое рабочее место, приборы и аппараты, отключить вентиляцию и электроприборы, проверить закрытие кранов газовых горелок, отключить освещение, провести ...
- 4.5.2. В конце рабочего дня тщательно вымыть руки и выполнить все требования личной гигиены.
- 4.5.3. Сообщить своему руководителю обо всех нарушениях и замечаниях, выявленных в процессе работы, и принятых мерах по их устранению.
- 1. Для введения семян T. foenum-graecum в культуру in vitro можно рекомендовать их стерилизацию 10-процентным водным раствором пероксида водорода в течение 15 мин., что обеспечивает высокий выход асептических проростков.
- 2. При клональном микроразмножении T. foenum-graecum наибольшую высоту растений, количество листьев и частоту ризогенеза имели растения на питательной среде QL + 1 мг/л ИМК. Однако полученные результаты не позволяют говорить о высокой эффективности да...
- 3. Для индукции каллусообразования у T. foenum-graecum можно рекомендовать питательную среду МС + 3 мг/л БАП. Каллус, культивируемый на ней, характеризуется наибольшей массой.
- 4. Использование каллусной ткани T. foenum-graecum для наработки фенольных соединений и флавоноидов нецелесообразно, так как их содержания значительно выше в семенах.
- 5. Изученные варианты минерального и гормонального состава питательной среды не позволили получить стабильную суспензионную культуру T. foenum-graecum. Необходимо подбирать питательные среды другого гормонального и/или минерального состава.
Usage statistics
|
|
Access count: 2
Last 30 days: 0 Detailed usage statistics |