Электронно-библиотечная система
РГАУ-МСХА имени К. А. Тимирязева

     

Детальная информация

Название: Оптимизация секреторной способности штамма Trichoderma reesei RUT-30C-продуцента целлюлолитических ферментов: защищена ..2026
Авторы: Веригина Ю. М.
Научный руководитель: Моисеенко К. В.; Синельников И. Г.
Организация: Российский государственный аграрный университет - МСХА имени К. А. Тимирязева; Институт Агробиотехнологии; Кафедра биотехнологии
Выходные сведения: Москва, 2026
Коллекция: Выпускные квалификационные работы
Тип документа: Другой
Тип файла: PDF
Язык: Русский
Код специальности ФГОС: 19.03.01
Группа специальностей ФГОС: 190000 - Промышленная экология и биотехнологии
Права доступа: Доступ по паролю из сети Интернет (чтение, печать, копирование)
Дополнительно: Новинка; Все документы
Ключ записи: RU/ЦНБ имени Н.И. Железнова/EBVKR-20260804-71548

Разрешенные действия:

Действие 'Прочитать' будет доступно, если вы выполните вход в систему или будете работать с сайтом на компьютере в другой сети

Группа: Анонимные пользователи

Сеть: Интернет

Права на использование объекта хранения

Место доступа Группа пользователей Действие
Локальная сеть РГАУ-МСХА Все Прочитать Печать
Интернет Читатели Прочитать Печать
-> Интернет Анонимные пользователи

Оглавление

  • Аннотация
  • Перечень сокращений и условных обозначений
  • Содержание
  • ВВЕДЕНИЕ
  • ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1.1 Trichoderma reesei RUT-C30 как промышленный продуцент целлюлолитических и гемицеллюлолизующих ферментов.
    • 1.2 Ферментный комплекс T. reesei
    • 1.2.1 Общий состав секретома
    • 1.2.2 Целлюлазный комплекс
    • 1.2.3 Гемицеллюлазный комплекс
    • 1.2.4 Маннаназный комплекс
    • 1.3 Применение ферментов T. reesei в промышленности
    • 1.4 Транскрипционная регуляция продукции целлюлаз и гемицеллюлаз у T. reesei
    • 1.4.1 Главный активатор Xyr1 и его коактиваторы
    • 1.4.2 Репрессоры CRE1 и Ace1
    • 1.4.3 Иерархия и взаимодействия регуляторов
    • 1.5 Стратегии повышения продуктивности T. reesei
    • 1.5.1 Увеличение копийности структурных генов
    • 1.5.2 Оверэкспрессия позитивных регуляторов
    • 1.5.3 Делеция негативных регуляторов
    • 1.5.4 Инженерия секреторного аппарата и стресс эндоплазматического ретикулума
    • 1.6 CRISPR/Cas9 для редактирования генома T. reesei и pyrG как селективный маркер
    • 1.6.1 CRISPR/Cas9 – общий принцип и применение в нитчатых грибах
    • 1.6.2 Ген pyrG как селективный маркер для трансформации T. reesei
    • 1.6.3 Применение в данной работе
  • ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
    • 2.1 Штамм
    • 2.2 Используемые в работе среды и буферы
    • 2.3 Дизайн рекомбинантных плазмид CRISPR/Cas9 для T. reesei RUT-C30
    • 2.4 Сборка рекомбинантных плазмид CRISPR/Cas9
    • 2.5 Трансформация штаммов Trichoderma reesei
    • 2.5.1 Трансформация и селективный отбор трансформантов с делецией гена pyrG
    • 2.5.2 Трансформация и селективный отбор трансформантов с делецией гена Ace1
    • 2.6 Верификация генетических модификаций: ПЦР-анализ и электрофорез ДНК.
    • 2.6.1 Выделение ДНК из мицелия
    • 2.6.2 ПЦР-анализ
    • 2.6.3 Электрофорез в агарозном геле
    • 2.6.4 Получение фрагментов для сиквенса и секвенирование
    • 2.7 Культивирование исходного и модифицированных штаммов T. reesei RUT-C30 на модельных субстратах в колбах
    • 2.8 Культивирование исходного и модифицированных штаммов T. reesei RUT-C30 на модельных субстратах в ферментерах
    • 2.9 Оценка секреторной активности: определение активности целлюлаз и ксиланаз и общего уровня секретируемого белка
    • 2.9.1 Определение активности целлюлаз и ксиланаз методом Шомоди-Нельсона в ферментном препарате
    • 2.9.2 Проведение электрофореза в полиакриламидном геле
    • 2.9.3 Осаждение белков ТХУ
    • 2.9.4 Определение концентрации белка по Бредфорду и Лоури
  • ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
    • 3.1 Трансформация T. reesei RUT-C30 и отбор рекомбинантных штаммов с делецией гена pyrG.
    • 3.2 Сравнение активности целлюлаз и ксиланаз методом Шомоди-Нельсона у штаммов RUT-C30 и dpyrG1
    • 3.3 Трансформация T. reesei dpyrG1 и отбор рекомбинантных штаммов с делецией гена Ace1
    • 3.4 Верификация генетических модификаций: ПЦР-анализ, электрофорез ДНК и секвенирование по Сэнгеру
    • 3.5 Оценка ферментативного профиля у штаммов dAce1, культивированных в колбах
    • 3.6 Оценка ферментативного профиля штамма Ace1-1, культивированного в ферментерах
    • 3.7 Сравнительный анализ ферментного профиля и обсуждение влияния делеции гена Ace1 на секреторную способность штаммов
    • 4.1 Общие требования охраны труда
    • 4.2 Требования охраны труда перед началом работы
    • 4.3 Требования охраны труда во время работы
    • 4.4 Требования охраны труда в аварийных ситуациях
    • 4.5 Требование охраны труда после окончания работы
  • ВЫВОДЫ
  • СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

Статистика использования

stat Количество обращений: 0
За последние 30 дней: 0
Подробная статистика